液相色譜是一種高效的分析手段，
液相色譜柱是色譜分析系統(tǒng)的“心臟”，由于被分析樣品種類繁多，加之樣品基質(zhì)復(fù)雜，色譜柱極易被強(qiáng)保留物質(zhì)污染。這些強(qiáng)保留物質(zhì)通常難以洗脫，多次上樣后，聚集在柱頭端，堵塞篩板，甚至可能與填料發(fā)生相互作用導(dǎo)致填料變性，這會導(dǎo)致柱效下降，分離度降低和峰型異常等現(xiàn)象。因而液相色譜柱的維護(hù)是十分必要的。
要知道
液相色譜柱的壽命除了與分析的樣品和流動相以及使用頻率有關(guān)外，主要的是與日常維護(hù)密切相關(guān)。由于衡量其壽命主要看柱效和柱壓，因此消除引起柱效降低和柱壓升高的因素成為延長色譜柱壽命的關(guān)鍵。具體維護(hù)注意如下：
1、流動相的PH：由于色譜柱硅膠基質(zhì)填料中存在Si-C和Si-O鍵，流動相的PH值超出范圍會導(dǎo)致基質(zhì)溶解和碳鏈斷裂，使得柱效下降，并且無法恢復(fù)，因此需嚴(yán)格控制流動相的PH。
2、去除樣品和流動相中的固體顆粒：固體顆粒會堵塞色譜
柱篩板，不僅會導(dǎo)致柱壓升高，同時(shí)由于堵塞會引起液流不均勻，導(dǎo)致色譜峰拖尾，變寬，分叉等現(xiàn)象，從而使柱效下降。因此分析前對樣品和流動相的超聲和過濾處理是必須的步驟。尤其對加了緩沖鹽的流動相更要注意。
3、正確使用緩沖鹽：緩沖鹽可以提供離子平衡的反離子，
并使流動相保持一定的離子強(qiáng)度和PH值，減少拖尾。緩沖鹽易溶于水，不溶于有機(jī)溶劑，因此不當(dāng)使用會致其析出，堵塞色譜柱，同時(shí)阻礙鍵合硅膠的碳鏈自由舒展，使色譜柱保留能力下降，柱效降低。正確使用緩沖鹽目的就是防析出，總結(jié)成一句就是---使用前要過渡，使用后要沖洗。
4、每次做完分析，都要進(jìn)行沖洗，分析用活動相中若無酸、堿、鹽類物質(zhì)，建議用90%甲醇沖洗30～60min;若分析用活動相中含以上物質(zhì)，要先用10%甲醇(或用與分析用活動相同比例，把含酸、堿、鹽溶液換成水)沖洗1小時(shí)左右，再梯度走到90%甲醇沖洗30～60min(若用多元泵)。有必要時(shí)再循環(huán)幾次，可以適當(dāng)縮短時(shí)間。若長時(shí)間不用該色譜柱，要沖洗好后，用純甲醇或乙腈封存。
在線留言
